1970年，Temin 和 Baltimore 從逆轉(zhuǎn)錄病毒中發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶 (RTase)，它具有依賴于 RNA 的 DNA 聚合酶 (RDDP)，依賴于 DNA 的 DNA 聚合酶 (DDDP) 以及切割 RNA-DNA 異源雙鏈的核糖核酸酶 H(RNase H) 三種活性。

　　幾十年來，RTase 已經(jīng)成為分子生物學中的一個關鍵工具，RTase 以 mRNA 為模板，由隨機引物、oligo(dT) 或基因特異性引物引導，合成互補的 DNA(complementary DNA，cDNA)，再以 cDNA 為模板，可擴增出不含內(nèi)含子的基因序列。這樣將逆轉(zhuǎn)錄與 PCR 擴增技術結合，大大推動了分子生物學、遺傳學和醫(yī)學領域的發(fā)展。

| 產(chǎn)品簡介 |

　　M-MLV GIII Reverse Transcriptase 是通過基因修飾和重組技術獲得的第三代 M-MLV 逆轉(zhuǎn)錄酶。該酶相對于野生型 M-MLV 逆轉(zhuǎn)錄酶去除了 RNase H 活性，并大幅提高了熱穩(wěn)定性（最適反應溫度為 50℃），從而大大提高了合成第一鏈 cDNA 時的特異性和長度，增強了對 RNA 復雜二級結構的耐受性。

| 產(chǎn)品優(yōu)勢 |

• 高純度，無核酸酶污染，無宿主 DNA 污染

• 溫度適應范圍廣，42℃~65℃均可完成逆轉(zhuǎn)錄反應

• 抑制劑耐受性強，對于 Trizol、SDS 等 RNA 提取中易于引入的污染具有更強的耐受能力

| 性能展示 |

1、無RNA酶污染殘留

M-MLV GIII Reverse Transcriptase（BE RTIII）和番茄RNA在37℃下孵育1h，孵育產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示RNA無明顯變化，即百時美逆轉(zhuǎn)錄酶產(chǎn)品中無RNase污染。

2、42-65℃下高效合成cDNA

分別使用百時美（BE）、A公司、B公司的逆轉(zhuǎn)錄酶，以RNA Marker為底物，在42℃、50℃、55℃、60℃和65℃不同溫度下，按照各品牌推薦的實驗體系，反應30min，逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示百時美逆轉(zhuǎn)錄酶在更寬的溫度范圍內(nèi)有效合成長達9Kb的cDNA產(chǎn)物。

3、最快10min即可反應完成

分別使用百時美（BE）、A公司、B公司的逆轉(zhuǎn)錄酶，以RNA Marker為底物，按照各品牌推薦的實驗體系和溫度，分別反應10、20、30min，逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳。結果顯示百時美逆轉(zhuǎn)錄酶10min即可有效合成長達9Kb的cDNA產(chǎn)物。

4、適應不同表達豐度基因

分別使用百時美（BE）、A公司、B公司的逆轉(zhuǎn)錄酶，以100ng Human RNA為模板，按照各品牌推薦的實驗體系和溫度，并結合qPCR技術測試不同表達豐度基因逆轉(zhuǎn)錄合成效率。結果顯示不同表達豐度的基因，百時美逆轉(zhuǎn)酶均能夠有效的逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA產(chǎn)物。

5、GIII具有較好的抑制劑耐受性

分別使用百時美（BE）、A公司、B公司的逆轉(zhuǎn)錄酶，以100ng番茄RNA為模板，按照各品牌推薦的實驗體系和溫度，并結合qPCR技術測試在含有Trizol、SDS等抑制劑時不同表達豐度基因逆轉(zhuǎn)錄合成效率。結果顯示百時美逆轉(zhuǎn)錄酶對上述抑制劑有較好的耐受性，競品公司的產(chǎn)品均不耐受0.004%SDS。

| 應用場景 |

　　可用于 First strand cDNA 合成、Second strand cDNA 合成、RNA primer extension、RT-PCR、RT-qPCR、RT-LAMP 和 cDNA 文庫構建等。

| 訂購信息 |

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